استخراج و خالص سازی تئوبرومین از پودر کاکائو و بررسی اثر برخی از ترکیب‏ های متیل زانتین(به عنوان دارو) بر رفتار سینتیکی آنزیم آدنوزین دآمیناز(ada)

تئوبرومین (3،7- دی متیل‏زانتین) و تئوفیلین (1،3- دی متیل‏زانتین) از ترکیب‏های آلکالوئیدی پورینی هستند که در منابع گیاهی وجود دارند. منبع اصلی تئوبرومین دانه‏های کاکائو و منبع اصلی تئوفیلین برگ‏های گیاه چای است. امروزه به دلیل اهمیت و کاربرد این ترکیب‏ها در درمان بسیاری از بیماری‏ها به صورت وسیع در داروهای جدید استفاده می‏شوند. آن‏ها در درمان بیماری‏هایی از قبیل فشارخون، آسم، سردرد و در شرایط آزمایشگاهی در درمان سرطان موثر هستند. آدنوزین دآمیناز (ada) که آنزیم اصلی در سوخت‏وساز پورین‏ها در بدن انسان است، در تمام بافت‏های انسان یافت شده و در انواع بیماری‏ها نیز اهمیت دارد. در این پژوهش سازوکار تئوبرومین استخراج شده از پودر کاکائو و تئوفیلین خریداری شده، روی فعالیت آنزیم آدنوزین دآمیناز بررسی شده است. استخراج تئوبرومین از پودر کاکائو با استفاده از دو روش بازروانی و حمام فراصوت انجام شده است. محصول به دست آمده در هر دو روش با دی اتیل اتر متبلور گردیده و سپس اثر غلظت‏های فیزیولوژیک (100 میکرومولار) تئوبرومین و تئوفیلین روی فعالیت آنزیم آدنوزین دآمیناز در بافر تریس هیدروکلراید (15/7ph=) با طیف سنجی فرابنفش - مرئی سنجش شده و نتایج با روش آنزیمی تفسیر گردید. در روش بازروانی حدود 45/0 گرم تئوبرومین خالص و در روش حمام فراصوت حدود 3/0 گرم تئوبرومین از 20 گرم پودر کاکائو به دست آمده است. بازده استخراج در روش بازروانی بیشتر است، اما مقدار حلال مصرفی در روش فراصوت کمتر است. نتایج حاصل از آنالیز آنزیمی نشان می‏‎دهد که منحنی اشباع آنزیم ada دو فازی است و از سینتیک میکائیلیس پیروی نمی‏کند. تئوبرومین و تئوفیلین هر دو فعالیت آنزیم را کاهش می‏دهند. علاوه بر این، آن‏ها اثر مهار برگشت ناپذیر بر فعالیت آنزیم دارند. آن‏ها هم به طور مستقیم و هم از طریق تغییرکیفیت اثر هموتروپیک، عملکرد جایگاه فعال آنزیم را تحت تاثیر قرار می‏دهند.